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產品名稱:Polyplus 101000046 jetPRIME? DNA/siRNA 轉染試劑（114-15）
產品貨號:101000046/114-15
產品規(guī)格:1.5ml
產品品牌:jetPRIME
供應商:Sartorius/賽多利斯
產品產地: 美國產品價格:￥2800
產品說明書:有

　　　　　北京　北京

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5°C±3°C保存

詳細信息：

Polyplus 101000046 jetPRIME® DNA/siRNA 轉染試劑（114-15）

名稱	品牌	貨號	規(guī)格	儲存
jetPRIME® DNA/siRNA 轉染試劑 jetPRIME® DNA/siRNA Transfection Reagent?	Polyplus	101000046	1.5ml	5°C±3°C

一、產品概述

jetPRIME®是一種高效、低毒性的陽離子聚合物轉染試劑，適用于將DNA、siRNA或miRNA轉染至多種哺乳動物細胞（包括難轉染細胞）。其獨特的配方確保高轉染效率，同時保持優(yōu)異的細胞存活率，廣泛應用于基因表達調控、RNA干擾（RNAi）、CRISPR基因編輯等研究。

二、核心特點??

1.高效率和低毒性??

♦適用于難轉染細胞（如原代細胞、干細胞、神經元等）。

♦細胞存活率高，轉染后無需更換培養(yǎng)基。

2.操作簡便??

♦無需優(yōu)化試劑/DNA比例，按推薦比例即可獲得高轉染效率。

♦復合物形成時間短（約10分鐘），直接加入細胞培養(yǎng)皿。

3.廣譜適用性??

♦兼容多種細胞類型（HEK293、HeLa、CHO、NIH/3T3等）。

♦同時適用于DNA和siRNA共轉染。

4.無血清兼容??

♦可在含或不含血清的培養(yǎng)基中使用。

三、核心優(yōu)勢

1.卓越的轉染效率

jetPRIME®是一種用于日常實驗的強大轉染試劑。它導致不同來源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的比例異常高。對于幾種常用的細胞系，與頂級競爭對手的試劑相比，jetPRIME®試劑獲得了70%至90%的優(yōu)異轉染效率

（圖1和圖2）。

圖1 jetPRIME與其主要競爭對手的轉染效率比較。在24孔板中轉染后24小時，通過FACS分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對Lipofectamine®2000和jetPRIME®的建議使用條件。

圖2:jetPRIME®與Lipofectamine®3000的轉染效率比較。在96孔板或24孔板中轉染后24小時，通過FACS分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對lipofectamine®3000和jetPRIME®的建議使用條件。

2.成本效益：更少的DNA和更少的試劑

jetPRIME®是一種高效的體外轉染試劑，需要少量試劑和質粒DNA，使用成本效益非常高（表1）。

Reagent	Volume of reagent per well	Amount of DNA per well	Number of transfections per 1.5 mL vial
jetPRIME®	2 – 4 μL	1 – 2 μg	375 – 750
Lipofectamine® 2000	5 – 12.5 μL	2.5 μg	120 – 300
Lipofectamine® 3000	3.75 – 7.5 μL	2.5 μg	200 – 400

表1 推薦使用條件。根據制造商的建議，用于轉染的6孔板中每個孔的DNA和試劑（jetPRIME®和競爭對手）的量。

除了降低成本外，使用更少的DNA還可以******限度地減少轉染引發(fā)的不良細胞毒性作用。因此，jetPRIME®是高轉染效率和優(yōu)異細胞活力的上選試劑。

3.更好的細胞活力

jetPRIME®在轉染過程中對細胞極為溫和，可提高細胞活力并改善轉染結果。用jetPRIME®轉染的細胞是健康的，而用競爭對手觀察到主要的細胞毒性（圖3）。

圖3 轉染后24小時細胞活力。根據制造商對每種試劑的建議進行轉染后24小時HeLa細胞的相位對比顯微鏡檢查。

4.易于使用的protocol

jetPRIME®是一種易于使用的轉染試劑：快速方便地放大和縮??；與血清和抗生素兼容。

圖4 jetPRIME® protocol。DNA、siRNA以及DNA和siRNA共轉染的方便方案。

四、產品規(guī)格

產品信息	提供有	jetPRIME®緩沖液
應用	應用	質粒轉染/基因組編輯/siRNA 轉染/不同核酸的聯(lián)合遞送
應用	細胞類型	貼壁細胞
生物學信息	傳遞分子類型	DNA和siRNA共培養(yǎng)
	緩沖液體積	2x60mL
	轉染次數(shù)	1.5mL jetPRIME®轉染試劑足以在24孔板中進行1500次轉染，或在6孔板中進行375次轉染；1.5mL jetOPTI®轉染試劑足以在24孔板中進行1500次轉染，或在6孔板中進行375次轉染。
通用參數(shù)	試劑與試劑盒類型	jetPRIME®
通用參數(shù)	試劑含量	jetPRIME® 1.5 mL

五、產品的應用??

1.質粒轉染

jetPRIME®可導致不同來源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的百分比顯著較高（表1）。

表1 使用jetPRIME®的各種細胞類型的轉染效率。轉染后24小時通過FACS分析測定GFP陽性細胞的百分比。

質粒是常見于細菌中的環(huán)狀DNA小分子。質粒與染色體DNA分開存在和復制，在細菌中，質粒通常攜帶有利于細菌生存的基因。質粒可以被有意地引入所需的細胞中，并用于在特定細胞系中過表達感興趣的基因。這種過程被稱為DNA轉染，是研究感興趣的基因功能或蛋白質的常用方法。

2.基因組編輯

CRISPR/Cas9系統(tǒng)在哺乳動物細胞中的使用最近已經成為在特定基因座修飾細胞基因組的一種非常方便的方法。它涉及將（a）編碼Cas9的一個或多個質粒、特異性gRNA和最終要插入的序列，或（b）一個或兩個質粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬時轉染到哺乳動物細胞中。

3.siRNA轉染

jetPRIME®可使多種細胞系的內源性基因表達降低90%以上。例如，jetPRIME®介導的用靶向HeLa細胞中內源性層粘連蛋白A/C的10nM siRNA雙鏈體轉染HeLa細胞，將層粘連蛋白/C基因表達顯著降低到幾乎無法檢測的水平（圖1）。

圖1使用jetPRIME®的內源性層粘連蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer層粘連蛋白A/C siRNA轉染HeLa細胞。48小時后，使用抗層粘連蛋白A/C的抗體通過免疫熒光顯微鏡評估層粘連蛋白/C沉默。

4.不同核酸的共轉染

jetPRIME®非常適合DNA和siRNA/miRNA共轉染實驗或幾種DNA質粒的共遞送。

Polyplus用jetPRIME®進行了DNA和siRNA遞送，并在各種毒性極低的細胞系中觀察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在貼壁細胞中實現(xiàn)了超過90%的沉默（圖2）。

圖2 使用jetPRIME®進行DNA和siRNA共轉染后，幾種細胞系中的外源性螢光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM熒光素酶siRNA進行實驗。

六、實驗流程（簡要版）??

1.制備轉染復合物：

♦在無菌管中混合DNA/siRNA + jetPRIME®（比例參考說明書）。

♦渦旋10秒，室溫靜置10分鐘。

2.轉染細胞：

♦將復合物滴加至細胞培養(yǎng)基中，輕柔混勻。

♦37°C培養(yǎng)24-72小時后檢測表達或沉默效果。

七、注意事項?

1.關鍵優(yōu)化點：

♦首次使用時，建議測試不同DNA:試劑比例（如0.5:1至1:3）。

♦轉染時避免使用抗生素（如Pen/Strep），以防細胞毒性。

2.適用細胞驗證：

♦對極難轉染細胞（如原代T細胞），可嘗試jetPRIME® Endo-Free版本（貨號：101000010）。

3.細胞狀態(tài)：

♦建議細胞密度達50-70%時轉染。

4.優(yōu)化建議：

♦首次使用可測試不同比例（參考說明書）。

八、儲存條件

5°C±3°C保存，避免冷凍或高溫（保質期見包裝標簽）。